Государственный Университет Медицины и Фармации им. Н. Тестемицану кафедра фармацевтической и токсикологической химии




Скачать 413.4 Kb.
НазваниеГосударственный Университет Медицины и Фармации им. Н. Тестемицану кафедра фармацевтической и токсикологической химии
страница3/3
Дата публикации08.04.2013
Размер413.4 Kb.
ТипДокументы
vbibl.ru > Химия > Документы
1   2   3

Экстракция — метод разделения, основанный на использовании экстрагента, не смешивающегося с ис­ходной фазой и легко отделяющегося от нее и от экстрагируемых компонентов. В зависимости от исходной фазы различают экстракцию из твердого вещества и экстракцию из раствора (жидкостную). По количеству операций экстракция может быть однократной и многократной. В фармацевтическом анализе экстракцию широко использу­ют для разделения компонентов, входящих в состав ЛФ, Кроме того, ее сочетают с фотометрией в экстракционно-фотометрическом методе, основанном на образовании испытуемым веществом цветных продуктов реак­ции, способных экстрагироваться каким-либо органическим растворителем. Затем в органической фазе выполняют фотометрическое определение экстрагированного продукта.

^ Хроматографические методы разделения веществ основаны на их распределении между двумя фаза­ми: подвижной и неподвижной. Подвижная фаза — жидкость или газ; неподвижная — твердое вещество или жид­кость, адсорбированная на твердом носителе. Относительная скорость перемещения частиц вдоль пути разделения зависит от их взаимодействия с неподвижной фазой. Поэтому каждое вещество проходит на носителе определен­ный путь. Отношение пути перемещения вещества к пути перемещения растворителя есть величина постоянная, обозначаемая Rf. Она является константой для данных условий разделения и используется для идентификации лекарственных веществ.

^ Хроматография на бумаге. Носителем неподвижной фазы (например, воды) служит специальная хроматографическая бумага. Распределение происходит между водой, находящейся на поверхности бумаги, и под­вижной фазой, которая представляет собой систему из нескольких растворителей. Испытание выполняют согласно требованиям ГФ XI (в.1, с.98) или АНД (ФС, ФСП). Для подтверждения подлинности одновременно хроматографируют испытуемое вещество и стандартный образец. Если они идентичны, то пятна на хроматограммах будут иметь оди­наковый вид и равные значения Rf. Чтобы исключить влияние на ошибку определения условий хроматографирования, пользуются более объективной константой Rs, которая представляет собой отношение величин Rf испытуе­мого и стандартного образцов. Хроматографию используют при испытании на чистоту. О наличии примесей судят по появлению дополнительных пятен на хроматограмме. Анализируемое вещество и примесь обычно имеют раз­ные значения Rf.

Количественное содержание вещества можно определить непосредственно на хроматограмме, используя планиметрический, денситометрический, люминесцентный и другие методы. Используют также способы, осно­ванные на элюировании анализируемого вещества из вырезанного и измельченного участка хроматограммы с со­ответствующим пятном. В элюате содержание испытуемого вещества определяют фотометрическим или электро­химическим методом.

^ Хроматография в тонком слое сорбента (ТСХ) отличается от хроматографии на бумаге тем, что процесс хроматографирования происходит на носителе (сорбенте), нанесенном тонким слоем на инертную по­верхность. Твердый сорбент может быть закрепленным или незакрепленным на этой поверхности. Сорбентом слу­жит силикагель или оксид алюминия. Для закрепления добавляют небольшие количества крахмала или сульфата кальция. Используют также пластинки промышленного изготовления типа «Силуфол УФ-254», «Сорбфил» и др.

Преимуществами ТСХ является простота приемов и оборудования, более высокая чувствительность, чем у бумажной хроматографии, устойчивость пластинок к температурным и химическим воздействиям, значительно большие возможности процессов разделения, детектирования, элюирования, меньшая продолжительность выпол­нения испытания. Все это создает широкие возможности в использовании ТСХ для выполнения испытаний на под­линность, на чистоту, для количественного определения лекарственных веществ в лекарственных формах.

Двумерное хроматографирование отличается повторным (после высушивания) пропусканием той же или иной подвижной фазы, но в перпендикулярном по отношению к первоначальному направлению. При этом исполь­зуют квадратные пластины или листы бумаги.

В фармацевтическом анализе широко применяют сочетание ТСХ с физико-химическими методами анали­за. Такие комбинированные методы, как хромато-спектрофотометрия, хромато-флуориметрия, хромато-массспектроскопия, особенно эффективны в анализе лекарственного растительного сырья и препаратов, содержащих большое число сопутствующих компонентов.

^ Гаэожидкостная хроматография (ГЖХ) основана на распределении компонентов смеси между га­зовой и жидкой или твердой фазами. Распределение происходит в результате многократных актов сорбции и де­сорбции анализируемых веществ, которые вводятся в поток газа-носителя, испаряются и в парообразном состоя­нии проходят через колонку с сорбентом. Поэтому метод ГЖХ применим для анализа летучих веществ или веществ, которые могут быть переведены в газообразное состояние. Разделенные вещества элюируются из колонки потоком газа-носителя, регистрируются детектором и фиксируются на хроматограмме в виде пиков, по которым можно идентифицировать или определять содержание каждого компонента смеси.

Газовый хроматограф включает в себя систему измерения и регулирования скорости потока газа-носителя, систему ввода пробы испытуемого образца, газохроматографическую колонку, систему термостатирования и кон­троля температуры в различных узлах прибора и систему детектирования, регистрации и обработки информации, полученной на приборе.

Подлинность лекарственных веществ методом ГЖХ можно подтвердить либо с помощью свидетелей, либо методом относи­тельных удерживаний. В первом случае доказательством идентичности служит совпадение времени удерживания вещества-свидетеля и одного из компонентов смеси лекарственных веществ при хроматографировании каждого в отдельности в одина­ковых условиях. Во втором случае вещество-свидетель добавляют к пробе, затем анализируют по рекомендуемой методике. Рассчитывают по формуле величину относительного удерживания, которая является постоянной для лекарственного вещества в конкретных условиях. Количественный анализ выполняют в тех же условиях, используя для расчетов такие па­раметры, как площадь или высота пиков лекарственных веществ. Площадь пиков устанавливают на хроматограмме с помощью плани­метра, интегратора или умножением высоты пика на его полуширину.

^ Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) отличается от ГЖХ тем, что подвиж­ной фазой служит не газ, а жидкость, причем она проходит через колонку, наполненную сорбентом, с большой скоростью за счет значительного давления. Поэтому ВЭЖХ позволяет разделять многокомпонентные смеси на индивидуальные вещества высокой степени чистоты. ВЭЖХ отличается высокой чувствительностью (до 10-6 г). На разделение 10-15 компонентов затрачивается 20-30 мин.

Жидкостный хроматограф включает такие узлы, как дозатор, насос высокого давления, высокоэффектив­ная колонка, детектор с регистрирующим устройством. Колонки изготавливают из нержавеющей стали, они имеют длину 10-25 см, внутренний диаметр 0,3-0,8 см и плотно набиваются адсорбентом с размером частиц 5-10 мкм. В качестве элюента используют различные углеводороды в сочетании с этанолом. Детектором обычно служит спектрофотометр с переменной длиной волны (190-900 нм), но существуют также флуориметрические, электро­химические и другие детекторы.

Подлинность испытуемых ЛВ подтверждают по времени выхода каждого компонента смеси из колонки, которое будет стабильно при одинаковых условиях проведения эксперимента. Количественное содержание рассчи­тывается по площади пика, которая пропорциональна количеству ЛВ в пробе.

Электрофорез — метод анализа, основанный на способности заряженных частиц к перемещению в электрическом поле. Скорость перемещения ионов зависит от напряженности электрического поля, величины за­ряда, размера частицы, вязкости, рН среды, температуры и других факторов. Электрофоретическая подвижность — величина, характерная для испытуемого вещества. Различают абсолютную (измеряемую в сантиметрах в секунду) и относительную электрофоретическую подвижность (отношение к подвижности стандартного образца). По технике выполнения и аналитическим возможностям электрофорез на бумаге и в тонких слоях сорбента сходен с ТСХ. Он позволяет разделять и идентифицировать компоненты различных смесей.
Вопросы для самоподготовки

  1. Значение физико-химических методов в фармацевтическом анализе.

  2. Принципы классификации физико-химических методов.

  3. Требования, предъявляемые к физико-химическим методам с целью применения их в анализе лекарственных форм.

  4. Области применения физико-химических методов в фармацевтическом анализе.

  5. Основные положения оптических методов: рефрактометрия, поляриметрия.

  6. Основные положения методов основанных на поглощении электромагнитного излучения: фотоколориметрия, спектрофотометрия, фототурбидиметрия, фотонефелометрия.

  7. Основные положения методов основанных на на испускании излучения: пламенно-эмиссионная спектрофотометрия, флуоресцентный метод, радиохимический метод.

  8. Основные положения методов основанных на использовании магнитного поля: спектроскопия ядерного магнитного резонанса (ЯМР), масс-спектрометрия.

  9. Основные положения электрохимические методов: потенциометрия, полярография.

  10. Основные положения термического методы анализа: дериватография.

  11. Основные положения методов разделения (хроматография): ТСХ, ГЖХ, ВЭЖХ, ионообменная хроматография и др.

  12. Роль стандартов в физико-химическом анализе лекарственных средств.



Практическая работа

Задание 1. Провести определение подлинности:

Сульфацетамид натрия (сульфацил натрия)

Определение максимума поглощения. 0,1 г препарата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют и доводят до метки фосфатным буфером с рН 7,0. 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят до метки фосфатным буфером с рН 7,0.

Оптическую плотность измеряют в области между 230 нм и 350 нм, максимум поглощения наблюдается при 255 нм.

Сульфадиметоксин

Снятие УФ-спектра. Около 0,15 г препарата (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл, прибавляют 10 мл 0,1 моль/л раствора натрия гидроксида. Встряхивают до полного растворения навески и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 5 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки. По 20 мл полученного раствора помещают в две конические колбы. В первую колбу прибавляют 4 мл 0,5 моль/л раствора натрия гидроксида, во вторую – 0,4 мл концентрированной серной кислоты.

УФ-спектр щелочного раствора препарата, снятый относительно кислого раствора препарата, в области от 240 до 280 нм имеет минимум поглощения при 2602 нм и при 2682 нм.

УФ-спектр кислого раствора препарата, снятый относительно щелочного раствора препарата в области от 285 до 300 нм имеет максимум поглощения при 2882 нм.

Триметоприл

Определение максимума поглощения. Растворяют 0,02 г препарата в 0,1 моль/л раствора натрия гидроксида и доводят тем же растворителем до 100 мл. Разбавляют 1 мл полученного раствора до 10 мл тем же растворителем. Максимум поглощения наблюдается между 230 нм и 350 нм, при 287 нм.

Сульфасалазин

Определение максимума поглощения. Растворяют 0,040 г препарата в 0,1 моль/л раствора натрия гидроксида и разбавляют до 250 мл тем же растворителем. Помещают 5 мл полученного раствора в мерную колбу вместимостью 100 мл содержащего 70 мл воды. Прибавляют 20,0 мл 0,1 моль/л раствора уксусной кислоты и доводят до метки водой. Максимум поглощения между 230 нм и 400 нм, наблюдаются при 238 нм и 359 нм.

Гидрохлортиазид ( гипотиазид, дихлотиазид)

Определение максимума поглощения. Щелочной раствор препарата имеет максимум поглощения при 273 нм и 323 нм.

Глибенкламид

Определение максимума поглощения. В среде метанола и кислоты хлороводородной максимум поглощения наблюдается при 300 нм и 275 нм.

Флуоресценция. Растворяют 0,020 г препарата. Раствор окрашивается и имеет голубую флуоресценцию в УФ-свете (365 нм).

Нитрофурал (Фурацилин)

Определение максимума поглощения. УФ-спектр раствора препарата, приготовленного для количественного определения в области от 245 нм до 450 нм имеет максимумы поглощения при 260 нм ±2 нм и минимум поглощения при 360 нм ±2 нм.

Нитрофурантоин (Фурадонин)

Определение максимума поглощения. УФ-спектр раствора препарата, приготовленного для количественного определения, в области 220 нм и 400 нм имеет два максимума поглощения, при 266 нм и 367 нм.

А при 367 нм

Отношение ------------------- должно быть от 1,36 до 1,42.

А при 266 нм
Рутозид (Рутин)

Определение максимума поглощения. 0,002% раствор препарата в абсолютном спирте при измерении на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 1 см имеет максимумы поглощения при длинах волн 259±1 нм и 362,5±1 нм.

Аценокумарол

Определение максимума поглощения. УФ-спектр 0,001 % раствора в диоксане имеет три максимума поглощения при 271 нм , 283 нм и 306 нм.

Цианокобаламин

Определение максимума поглощения. 0,002 % раствор препарата имеет максимумы поглощения при 278±1 нм; 361±1 нм и 548 ±2 нм.

Клонидин (клофелин)

Снятие ИК-спектра. ИК-спектр клонидина должен соответствовать спектру стандартного образца в виде таблеток с калия бромидом.

Определение максимума поглощения. УФ-спектр 0,03 % раствора препарата в 0,1 моль/л растворе НСl должен иметь два максимума: при 271 нм и при 278 нм.

Метронидазол

Снятие ИК-спектра. ИК-спектр клонидина должен соответствовать спектру стандартного образца в виде таблеток с калия бромидом.

Определение максимума поглощения. УФ-спектр 0,001 % раствора препарата в 0,1 моль/л растворе НСl должен иметь максимум поглощения при 277 нм.

Тинидазол

Снятие ИК-спектра. ИК-спектр тинидазола должен соответствовать спектру стандартного образца в виде таблеток с калия бромидом.

Определение максимума поглощения. УФ-спектр 0,001 % раствора препарата в метаноле имеет один максимум поглощения при 310 нм.

Клотримазол

Снятие ИК-спектра. ИК-спектр клотримазола должен соответствовать спектру стандартного образца в виде таблеток с калия бромидом.

Определение максимума поглощения. УФ-спектр 0,02 % раствора препарата в метаноле имеет один максимум при 259 нм.

Провести определение подлинности.

Пиритинола дигидрохлорид

Снятие ИК-спектра. ИК-спектр препарата должен соответствовать стандарту в калия бромиде.

Определение максимума поглощения. УФ-спектр 0,001 % раствора в растворе 0,02 моль/л растворе НСl имеет максимум поглощения при 297 нм.

Нифедипин

Определение максимума поглощения. УФ-спектр 0,0025 % раствора препарата в метаноле дает максимум при длине волны 235 нм и плечо при 350 и 355 нм.

Соли хинина и хинидина

Флюоресценция сернокислых растворов. К 5мл растворов солей хинина и хинидина (0,1:100) добавляют 2-3 капли разведенной кислоты серной; наблюдается голубая флюоресценция.

Хлорохин (хингимин)

Определение максимума поглощения. 0,001% растворов прeпарата в 0,01 г раствора хлороводородной кислоты имеет в области от 220нм до 350 нм максимумы поглощения около 257, 329 и 343нм.

Тиамина бромид (хлорид), кокарбоксилаза, фосфотиамин

Реакции образования тиохрома. 0,05 г препарата растворяют в 25 мл воды. К 5 мл раствора приливают 1 мл раствора калия гексацианоферрата (III), 1 мл раствора натрия гидроксида 3 5 мл бутилового или изоамилового спирта, хорошо встряхивают и дают отстояться. В верхнем слое наблюдаемая в УФ-свете синяя флуоресценция, исчезающая при подкислении и вновь возникающая при подщелачивании.

Меркаптопурин

Определение максимума поглощения. 0,0005% раствор препарата в 0,1 моль/л растворе хлороводородной кислоты в области от 260 до 350 нм. Имеет один максимум поглощения около 325 нм. Для приготовления 0,0005 % раствора препарата применяют предварительно нагретый 0,1 моль/л раствор хлороводородной кислоты.

Пентоксифиллин

Определение максимума поглощения.0,001 % раствор препарата имеет максимум поглощения при 274 нм.

Кислота фолиевая

Реакция гидролитического окисления. 0,01 г препарата растворяют в 5 мл 0,1 моль/л раствора натрия гидроксида, добавляют 5 мл 0,1 моль/л раствора хлороводородной кислоты и 1 мл раствора калия перманганата. Раствор помещают на 3 минуты в водяную баню с температурой 80-850С. К охлажденному раствору прибавляют по каплям раствор пероксида водорода до обесцвечивания и фильтруют. Фильтрат имеет флуоресценцию в УФ-свете.

Определение максимумов поглощения. 0,001 % раствор препарата в 0,1 моль/л растворе натрия гидроксида имеет максимумы поглощения при 256, 283 и 365 нм.

А при 256 нм

Отношение ----------------------- составляет 2,8 - 3,0

А при 365 нм

Рибофлавин

Флуоресценция в УФ-свете. 0,01 г препарата растворяют в 100 мл воды, раствор имеет яркую зеленовато-желтую окраску. При просматривании в УФ-свете обнаруживается интенсивная зеленая флуоресценция, исчезающая при добавлении кислоты хлороводородной и натрия гидроксида; при добавлении натрия гидросульфита исчезают и флуоресценция и окраска.

Хлордиазепоксид

Реакция с кислотой серной. К 10 мг хлордиазепоксид прибавляют 0,3 мл конц. кислоты серной; наблюдается желто-оранжевая флюоресценция, которая при добалении воды переходит в синею.

Диазепам

Реакция с кислотой серной. К 10 мг диазепама прибавляют 3 мл 0,1 моль/л раствора кислоты серной и нагревают до кипения в течение 3 мин; наблюдается желто- зеленая флюоресценция.
Задание 2. Проведите количественное определение следующих лекарственных веществ:

Хлорамфеникола (левомицетин)

Спектрофотометрия.0,1 г препарата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и растворяют при нагревании, около 500С, охлаждают и доводят водой до метки. 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят водой до метки и измеряют оптическую плотность полученного раствора при длине волны 278 нм.

А1%1см (при 278 нм) = 298

Сульфасалазин

Спектрофотометрия. 0,150 г препарата (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют и доводят до метки 0,1 моль/л раствором натрия гидроксида. Помещают 5 мл полученного раствора в мерную колбу вместимостью 1000 мл, содержащую около 750 мл воды, перемешивают, прибавляют 20,0 мл 0,1 моль/л раствора кислоты уксусной и доводят водой до метки. Определяют оптическую плотность полученного раствора и стандартного раствора с концентрацией 7,5 мкг/мл стандартного сульфасалазина, при длине волны 359 нм.

Расчет количественного содержания проводится по формуле:

Ах . 20 . Сст

С = ---------------------

А ст

где Ах,, А ст – оптические плотности исследуемого и стандартного растворов, соответственно;

Сст – концентрация стандартного раствора, в мкг/мл

Нитрофурал (фурацилин)

Фотоколориметрическое определение. Около 0,02 г препарата (точная навеска) растворяют в 70-80 мл в мерной колбе вместимостью 100 мл при нагревании на водяной бане при 70-800С. После охлаждения объем доводят водой до метки.

К 0,5 мл полученного раствора прибавляют 7,5 мл воды, 2 мл 0,1 моль/л раствора натрия гидроксида и перемешивают. Через 20 минут измеряют оптичекую плотность полученного раствора (А1) на фотоколориметре при длине волны около 450 нм (синий светофильтр) в кювете с толщиной слоя 3 мм. В качестве контрольного раствора используют воду. Параллельно проводят реакцию с 0,5 мл 0,02 % стандартного раствора фурацилина и измеряют оптическую плотность (А2).

Содержание фурацилина в процентах (х) вычисляют по формуле :

А1 . аст . 100 . 0,5 . 100

Х = -----------------------------

А2 . а . 0,5 . 100

где а, а ст – навеска препарата и стандарта соответственно в граммах

Фотоколориметрическое определение. Около 0,75 г препарата (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл, растворяют в 30 мл диметилформамида. Доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. 5 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл. доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 375 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

В качестве контрольного раствора используют воду.

Параллельно измеряют оптическую плотность стандартного образца нитрофурала.

Содержание нитрофурала в процентах (Х) вычисляют по формуле:

А . аст . 100 . 100

Х = -------------------------- ,

Аст . а . (100-В)

где А, Аст – оптическая плотность исследуемого и стандартного растворов соответственно;

а, аст – навеска препарата и стандарта, соответственно, г;

В – содержание воды в препарате

Содержание С6H6N4O4 в пересчете на сухое вещество должно быть не менее 98 % и не более 102,0 %.

Нитрофурантоин (фурадонин)

Фотоколориметрическое определение. Около 0,1 г препарата (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют около 50 мл воды и 2,5 мл 1 моль/л раствора натрия гидроксида, растворяют при перемешивании, доводят объем раствора водой до метки и хорошо перемешивают. 0,6 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и точно через 20 минут, считая с момента прибавления 1 моль/л раствора натрия гидроксида. Определяют оптическую плотность полученного раствора на фотоэлектроколориметре в кювете с толщиной слоя 1 см и фиолетовым светофильтром с длиной волны около 360 нм. В качестве контрольного раствора используют воду.

Содержание фурадонина в процентах (Х) вычисляют по формуле:
А . 100 . 100

Х = ------------------------ ,

А1см1% . а . 0,6

где А – оптическая плотность испытуемого раствора;

А1см1% - удельный показатель поглощения стандартного образца, определенный в тех же условиях;

а – навеска препарата в граммах.

Содержание С8H6N4O4 . Н2О в пересчете на сухое вещество должно быть не менее 98 % и не более 102,0 %.

Спектрофотометрическое определение. Около 0,120 г препарата (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 1000 мл, растворяют в 50 мл диметилформамида. Доводят объем раствора водой до метки. 5 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл. доводят объем до метки раствором, содержащим 1,8 % натрия ацетата и 0,14 % безводной уксусной кислоты. Измеряют оптическую плотность полученного раствора при длине волны 367 нм.

В качестве контрольного раствора используют раствор натрия ацетата, указанного выше.

Содержание С8H6N4O5 в процентах вычисляют по формуле:

А . 1000 . 100

Х = ------------------------ ,

765 . а . 5

где А – оптическая плотность испытуемого раствора;

765 - удельный показатель поглощения (А1см1%) стандартного образца нитрофурантоина;

а – навеска препарата в граммах.
Содержание С8H6N4O5 в пересчете на сухое вещество должно быть не менее 98% и не более 102,0 %.
Фуразолидон

Фотоколориметрическое определение. Около 0,1 г препарата (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл. прибавляют 30 мл диметилформамида. После растворения препарата прибавляют 0,05 моль/л спиртового раствора калия гидроксида, преремешивают, охлаждают до 200С, доводят объем раствора диметилформамидом до метки и перемешивают. 0,6 мл полученного раствора перемешивают в мерной колбе вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и точно через 20 минут, считая с момента прибавления 0,05 моль/л спиртового раствора каоия гидроксида, измеряют оптическую плотность полученного раствора на фотоэлектроколориметре в кювете с толщиной слоя 0,5 см и фиолетовым светофильтром с длиной волны около 360 нм.

В качестве контрольного раствора используют воду.

Содержание фуразолидона в процентах (Х) вычисляют по формуле:

А . 50 . 100

Х = ------------------------ ,

А1см1% . а . 0,6 . 0,5

где А – оптическая плотность испытуемого раствора;

А1см1% - удельный показатель поглощения стандартного образца фуразолидона, определенный в тех же условиях;

а – навеска препарата в граммах.

Содержание С8H7N3O5 в пересчете на сухое вещество должно быть не менее 98% и не более 102,0 %.
Рутозид (Рутин)

Спектрофотометрическое определение. Около 0,025 г препарата (точная навеска) растворяют в 10 мл горячего абсолютного спирта и фильтуют через стеклянный фильтр №4 при слабом разрежении. Фильтр промывают горячим абсолютным спиртом (2 раза по 10 мл). Объединенные фильтраты переносят в мерную колбу емкостью 100 мл, охлаждают и доводят объем раствора тем же спиртом до метки. 5 мл спиртового раствора помещают в мерную колбу емкостью 50 мл и доводят объем раствора абсолютным спиртом до метки. Определяют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длинах волн 375 нм (А1) и 362,5 нм (А2) в кювете с толщиной слоя 1 см. Если отношение (А1)/(А2) находится в пределах 0,875±0,004, то содержание рутина в процентах (Х) вычисляют по формуле :

2) . 1000

Х = --------------- ,

325,5 . а

где 325,5 – удельный показатель поглощения А1%1см чистого рутина (безводного) в абсолютном спирте при длине волны 362,5 нм

а – навеска в граммах.

Если отношение (А1)/(А2) превышает 0,879, то содержание рутина в процентах (Х) вычисляют по формуле:

14,60 . (А2) – 13,18 .(А1)

Х = -------------------------------- ,

а

Содержание С27Н30О16 в пересчете на сухое вещество должно быть не менее 95,0 %.

Платифиллина гидротартрат

Метод экстракционной фотометрии. Около 0,1 г (точная навеска) порошка растертых таблеток помещают в делительную воронку емкостью 50 мл и встряхивают с 2,5 мл воды. Затем прибавляют 0,4 мл 1 % раствора тропеолина 000-II, 3 капли 0,5 моль/л раствора соляной кислоты, 20 мл хлороформа и встряхивают содержимое воронки в течение 1 минуты. Отстоявшийся хлороформный слой переносят в мерную колбу емкостью 200 мл. Извлечение повторяют еще 4 раза, употребляя каждый раз по 20 мл хлороформа и встряхивая в течение 1 минуты. Хлороформные извлечения переносят в ту же мерную колбу, объем раствора доводят хлороформом до метки и перемешивают. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на фотоэлектроколориметре, с синим светофильтром в кювете с толщиной слоя 5 мм. Контрольным раствором служит хлороформ.

Параллельно проводят контрольный опыт с 2,5 мл раствора стандартного образца платифиллина гидротартрата.

Содержание платифиллина гидротартрата в граммах (Х) вычисляют по формуле:

А1 . б . 0,002 . 2,5

Х = ------------------------ ,

А0 . а

где А1– оптическая плотность испытуемого раствора

А0- оптическая плотность стандартного образца;

0,002 – содержание платифиллина гидратартрата в граммах в 1 мл раствора стандартного образца;

а – навеска препарата в граммах;

б – средняя масса таблетки в граммах.

Содержание С18H27NO5 . С4Н6О6 в должно быть 0,0045-0,0055 г, считая на среднею массу одной таблетки.

Цианокобаламин

Спектрофотометрический метод. Около 0,1 г препарата (точная навеска) растворяют в воде в мерной колбе емкостью 500 мл и доводят объем раствора до метки. 25 мл этого раствора переносят в мерную колбу емкостью 250 мл и доводят объем раствора водой до метки. Определяют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 361 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.

Содержание цианокобаламина в процентах (Х) вычисляют по формуле:

А . 500. 10

Х = ------------------------ ,

207 . а
где А – оптическая плотность испытуемого раствора;

207- удельный показатель поглощения А1см1% чистого цианокобаламина (безводного) при длине волны 361 нм;

а – навеска препарата в граммах.

Содержание С63H88СоN14Р в пересчете на сухое вещество должно быть не менее 95,0 %.

Линкомицин гидрохлорид и клиндамицин

Количественное определение проводится методом газо-жидкостной хроматографии.

Прозерин

Метод ионообменной хроматографии. Около 0,03 г (точная навеска) препарата растворяют в 10 мл воды, пропускают через колонку с катионитом КУ-2 в Н-форме (RH) со скоростью вытекания 20-25 капель в минуту. Далее колонку промывают водой (30-50 мл) до нейтральной реакции по метиловому оранжевому. Промывную жидкость присоединяют к основному фильтрату и титруют из полумикропипетки 0,1 моль/л раствором натрия гидроксида (индикатор – метиловый оранжевый).

1 мл 0,1 моль/л раствора натрия гидроксида соответствует 0,03344 г прозерина.
Задание 3. Проведите количественное определение лекарственных веществ спектрофотометричесим методом, согласно данных приведенных в таблице:


Препарат

Растворитель

Длина волны, нм

А1%/1см


Никотинамид

Никотиновая кислота

Пиридоксальфосфат

Пиридоксина гидрохлорида
Изониазид

Фтивазид

Пиридинолкарбамат (пармидин)



0,1 моль/л раствор хлороводородной кислоты
Вода

0,1 моль/л раствор хлороводородной кислоты
Фосфатный буферный раствор, рН ≈ 7,0

Вода

0,01 моль/л раствор хлороводородной кислоты
0,1 моль/л раствор хлороводородной кислоты
Кислота хлороводородная




261

262
260
388

330
292

266

267

268


438

309,7
246,9
201


312,93







Хинина сульфата


Хинина гидрохлорида

Этиловый спирт

Этиловый спирт

Этиловый спирт

0,1 моль/л HCl

0,1 моль/л HCl

0,1 моль/л HCl

Этиловый спирт Этиловый спирт Этиловый спирт

234

278

331

318

318

347

234

278

331

860,0

98,7

125,1

115

112

140,3

880,03

98,00

127,98

Апоморфина гидрохлорид

Кодеин


Кодеин фосфат

Морфина гидрохлорид
Тримеперидин гидрохлорид (промедол)

Вода

Вода

0,1 моль/л НС1
Этиловый спирт

0,1 моль/л НС1

Буферный раствор с рН 2,0-4,0
Этиловый спирт

Вода
Вода

0,1 моль/л НС1
Вода


272

270

272
284

285

285
284

285
285

285
255

530,6

512,3

531,75
50,11

55,62

53,04
40,56

37,01
39,9

39,7
6,30

Тиамина - хлорид


Вода

То же

0,1моль/ л раствор хлороводородной кислоты.

234

262
260

282,5

197,5
246,9

Тиамина - хлорид

Вода

274

212,3

Фосфатиамин

Фосфатный буферный – раствор рН7,0







Методика. На основании данных таблицы рассчитать навеску лекарственного вещества для проведения количественного определения с учетом необходимого разведения (А  0,4).

Приготовить раствор, для анализа исходя из полученных выше данных, и рассчитать содержание вещества в анализируемом образце.

Нифедипин

Спектрофотометрический метод. 0,125 г препарата растворяют в 50 мл метанола и доводят тем же растворителем до 100 мл в мерной колбе. 1 мл раствора разводят метанолом до 50 мл в мерной колбе и определяют оптическую плотность при 350 нм.

А1%1см при 350 нм = 140.

Содержание нифедипина в препарате должно быть не менее 99,5 %.

Кислота фолиевая

Условия спектрофотометрического определения. Спектрофотометрическое определение фолиевой кислоты в 5 моль/л растворе серной кислоты.при 320 нм может быть использовано для анализа ее в лекарственных смесях.( А1%1см – 209,8).

Рибофлавин

Спектрофотометрический метод. Около 0,06 г препарата (точная навеска) растворяют в мерной колбе вместимостью 1000 мл в смеси 2 мл ледяной уксусной кислоты и 500 мл воды при нагревании на водяной бане. Раствор охлаждают и доводят объем раствора водой до метки. 10 мл этого раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, добавляют 3,5 мл 0.1 моль/л раствора натрия ацетата и доводят объем раствора водой до метки. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 267 нм.

Содержание рибофлавина в процентах (Х) вычисляют по формуле :

А . 10000

Х = ------------------ ,

а . 850

где А – оптическая плотность испытуемого раствора;

а – навеска в граммах;

850 – удельный показатель поглощения А1%1см чистого рибофлавина при длине волны 267 нм

Содержание С17Р20N4O6 в препарате должно быть 98,0-102,0 % в пересчете на сухое вещество.

Рибофлавин-мононуклеотид

Спектрофотометрический метод в видимой области спектра. Около 0,1 г препарата (точная навеска) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 250 мл, добавляют 0,5 мл ледяной уксусной кислоты и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл переносят 1 мл полученного раствора, добавляют 1 мл 0,1 моль/л раствора натрия ацетата и доводят объем раствора водой до метки. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 445 нм.

Содержание (%) рибофлавина мононуклеотида вычисляют по формуле:
А . 250 . 25 . 1,2709

Х = ----------------------------- ,

а . 323

где А – оптическая плотность испытуемого раствора;

а – навеска в граммах;

323 – удельный показатель поглощения А1%1см при длине волны 445 нм

1,2709 – коэффициент пересчета рибофлавина в рибофлавине мононуклеотиде, полученный путем деления молекулярной массы безводного рибофлавина-мононуклеотида на молярную массу рибофлавина (478,33 : 376,37 = 1,2709).

^

Итоговый контроль





  1. Проверка теоретических знаний по вопросам самоподготовки и итоговым заданиям.

  2. Проверка студентов о выполнении практической работы.


^
Итоговые задания




  1. При количественном определении фурадонина по АНД (см. задание 2) установлено, что А = 0,466; А1см1% = 750; а= 0,1017 г. Соответствует ли содержание (%) фурадонина требованиям АНД?

  2. Рассчитайте содержание нифедипина в препарате, если известно, что на анализ взята навеска 0,1288 г, оптическая плотность раствора в метаноле при длине волны 350 нм равна 0,418; величина специфической абсорбции равна 140,0; разведение 5000.

Сделайте заключение о качестве препарата, если содержание нифедипина в препарате должно быть не менее 99,5 %.

  1. Рассчитайте удельное вращение водного раствора кокаина гидрохлорида, если угол вращения =1,75º. Проверьте и обоснуйте ответ в соответствии с требованиями АНД.

  2. Рассчитайте удельный показатель поглощения трихомонацида при длине волны 357 нм, если оптическая плотность 0,001% раствора вещества равна 0,52.

  3. Напишите структурную формулу, латинское, румынское и химическое названия тримеперидина гидрохлорида.

Рассчитайте содержание (%) тримеперидина гидрохлорида в анализируемом спиртовом растворе, если при длине волны 255 нм и величине специфической абсорбции 6,3, оптическая плотность – 0,409. Рассчитайте коэффициент разведения.

  1. Напишите структурную формулу, латинское, румынское и химическое названия кодеина.

Рассчитайте необходимое разведение для определения содержания (%) кодеина в анализируемом образце (спиртовой раствор), если при длине волны 284 нм и величине специфической абсорбции 50,11 оптическая плотность должна быть около 0,400. Масса навески – 0,4005 г.

  1. Рассчитайте концентрацию раствора тиамина бромида для спектрофотометрического количественного определения, при длине волны 262 нм, А 1%1см = 197,5 и А = 0,400.



Литература

  1. Конспект лекций.

  2. Farmacopea română. Ediţia X-a –Bucureşti: Editura medicală, 1993.-1315 p.

  3. Государственная фармакопея СССР: Вып. 1, ХI изд., – М.: Медицина, 1987. – 336 с.

  4. Государственная фармакопея СССР: Вып. 2, ХI изд., – М.: Медицина, 1989. – 400 с.

  5. Bojiţă M., Roman L., Săndulescu R., Oprean R. Analiza şi Controlul medicamentelor.Vol. I. - Cluj-Napoca: Editura Intelcredo, 2003. – 495 p.

  6. Bojiţă M., Roman L., Săndulescu R., Oprean R. Analiza şi Controlul medicamentelor.Vol. II. - Cluj-Napoca: Editura Intelcredo, 2003. –768 p.

  7. Вabilev F.V. Chimie farmaceutică, Chişinău: Universitas, 1994.- 675 р.

  8. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия.- М.: Медицина, 1985. – 768 с.



1   2   3

Похожие:

Государственный Университет Медицины и Фармации им. Н. Тестемицану кафедра фармацевтической и токсикологической химии iconГосударственный Университет Медицины и Фармации им. Н. Тестемицану...
Статистические методы обработки результатов анализа и их применение в биофармацевтическом анализе

Государственный Университет Медицины и Фармации им. Н. Тестемицану кафедра фармацевтической и токсикологической химии iconГосударственный Университет Медицины и Фармации им. Н. Тестемицану...
Основные показатели качества и методы их контроля, включаемые в анд, должны отражать особенности физико-химических свойств лекарственного...

Государственный Университет Медицины и Фармации им. Н. Тестемицану кафедра фармацевтической и токсикологической химии iconГосударственный Университет Медицины и Фармации им. Н. Тестемицану...
При проведении количественного анализа лекарственных средств достаточно широко применяются классические (химические) методы анализа....

Государственный Университет Медицины и Фармации им. Н. Тестемицану кафедра фармацевтической и токсикологической химии iconГосударственный Университет Медицины и Фармации им. Н. Тестемицану...
При проведении количественного анализа лекарственных средств достаточно широко применяются классические (химические) методы анализа....

Государственный Университет Медицины и Фармации им. Н. Тестемицану кафедра фармацевтической и токсикологической химии iconГосударственный Университет Медицины и Фармации им. Н. Тестемицану Фармацевтический факультет
Контроль качества лекарственных средств, задачи и проблемы. Организация контроля качества в Pеспублике Молдова

Государственный Университет Медицины и Фармации им. Н. Тестемицану кафедра фармацевтической и токсикологической химии iconМинистерство Здравоохранения Республики Молдова Государственный Университет...
Учитывая, что лекарственные вещества и их метаболиты, находятся в очень малых количествах для их извлечения, применяются различные...

Государственный Университет Медицины и Фармации им. Н. Тестемицану кафедра фармацевтической и токсикологической химии iconНиколая Тестемицану
Углубление и расширение практических и теоретических знаний по фармацевтической химии, воспитание профессиональной ответственности...

Государственный Университет Медицины и Фармации им. Н. Тестемицану кафедра фармацевтической и токсикологической химии iconГбоу впо «Сургутский государственный университет хмао-югры» кафедра «управления персоналом»
Сургутский государственный университет был основан в 1993 году. Сегодня Сургу молодой, мобильный, развивающийся университет, который...

Государственный Университет Медицины и Фармации им. Н. Тестемицану кафедра фармацевтической и токсикологической химии iconН ижегородский государственный педагогический университет кафедра...
Нижегородский государственный педагогический университет, Главный корпус (Нижний Новгород, ул. Ульянова,1)

Государственный Университет Медицины и Фармации им. Н. Тестемицану кафедра фармацевтической и токсикологической химии iconНовосибирский государственный университет
Министерство образования и науки Российской Федерации новосибирский государственный университет экономики и управления «нинх» Кафедра...

Вы можете разместить ссылку на наш сайт:
Школьные материалы


При копировании материала укажите ссылку © 2013
контакты
vbibl.ru
Главная страница